動物細胞培養的步驟簡介
1、復甦,把凍存管從液氮中取出來,立即投入37℃水浴鍋中,輕微搖動。液體都融化後(大概1-1.5分鐘),拿出來噴點酒精放到超淨工作臺裏。把上述細胞懸液吸到裝10ml培養基的15ml的離心管中(用培養基把凍存管洗一遍,把粘在壁上的細胞都洗下來),1000轉離心5分鐘。把上清液倒掉,加1ml培養基把細胞懸浮起來。吸到裝有10ml培養基的10cm培養皿中前後左右輕輕搖動,使培養皿中的細胞均勻分佈。標好細胞種類和日期、培養人名字等,放到CO2培養箱中培養,細胞貼壁後換培養基。3天換一次培養基。
2、傳代,培養皿中的細胞覆蓋率達到80%-90%時要傳代。把原有培養基吸掉。加適當的胰蛋白酶(能覆蓋細胞就行),消化1-2分鐘。細胞都變圓後加如入等體積的含血清的培養基終止消化。用移液槍吹打細胞,把細胞都懸浮起來。把細胞吸到15ml的離心管中,1000轉離心5分鐘。倒掉上清液,加1-2ml培養基,把細胞都吹起來。根據細胞種類把細胞傳到幾個培養皿中。一般,癌細胞分5個,正常細胞傳3個。繼續培養。
3、凍存,把細胞消化下來並離心(同上)。用配好的凍存液把細胞懸浮起來,分裝到滅菌的凍存管中,靜止幾分鐘,寫明細胞種類,凍存日期。4℃ 30min,-20℃ 30min,-80℃過夜,然後放到液氮灌中保存。凍存液的配製:70%的完全培養基 20??%DMSO. DMSO要慢慢滴加,邊滴邊搖。
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夾雜着造句
造句指懂得並使用字詞,按照一定的句法規則造出字詞通順、意思完整、符合邏輯的句子。依據現代語文學科特徵,可延伸爲寫段、作文的基礎,是學生寫好作文的基本功。造句來源清俞樾《春在堂隨筆》卷八:“其用意,其造句,均以纖巧勝。”夏丏尊葉聖陶《文心雕龍》四:“造句也...
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淪陷意思是什麼意思
1、淪陷,漢語詞語,讀音爲lúnxiàn,領土或國土被敵人佔領或陷落在敵人手裏,常指被敵佔領一段長的時間;淪落,指陷入不良的境地、流落。2、出處:北魏·酈道元《水經注·沔水三》:“《神異傳》曰:由卷縣,秦時長水縣也……忽有大水長欲沒縣;主簿令幹入白令,令見幹曰:‘何忽作魚?...
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臨江仙陳與義表達什麼感情
1、原文:高詠楚詞酬午日,天涯節匆榴花不似舞裙紅,無人知此歌罷滿簾風。萬事一身傷老矣,戎葵凝筆牆東。酒杯深淺去年同,試澆橋下水,今夕到湘中。2、譯文:我放聲吟誦楚辭,度過端午。此時我漂泊在天涯遠地,是一個匆匆過客。異鄉的石榴花再紅,也比不上京師裏的舞者裙衫飄飛,那...
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用正菜造句子
造句指懂得並使用字詞,按照一定的句法規則造出字詞通順、意思完整、符合邏輯的句子。依據現代語文學科特徵,可延伸爲寫段、作文的基礎,是學生寫好作文的基本功。造句來源清俞樾《春在堂隨筆》卷八:“其用意,其造句,均以纖巧勝。”夏丏尊葉聖陶《文心雕龍》四:“造句也...