動物細胞培養的步驟簡介
1、復甦,把凍存管從液氮中取出來,立即投入37℃水浴鍋中,輕微搖動。液體都融化後(大概1-1.5分鐘),拿出來噴點酒精放到超淨工作臺裏。把上述細胞懸液吸到裝10ml培養基的15ml的離心管中(用培養基把凍存管洗一遍,把粘在壁上的細胞都洗下來),1000轉離心5分鐘。把上清液倒掉,加1ml培養基把細胞懸浮起來。吸到裝有10ml培養基的10cm培養皿中前後左右輕輕搖動,使培養皿中的細胞均勻分佈。標好細胞種類和日期、培養人名字等,放到CO2培養箱中培養,細胞貼壁後換培養基。3天換一次培養基。
2、傳代,培養皿中的細胞覆蓋率達到80%-90%時要傳代。把原有培養基吸掉。加適當的胰蛋白酶(能覆蓋細胞就行),消化1-2分鐘。細胞都變圓後加如入等體積的含血清的培養基終止消化。用移液槍吹打細胞,把細胞都懸浮起來。把細胞吸到15ml的離心管中,1000轉離心5分鐘。倒掉上清液,加1-2ml培養基,把細胞都吹起來。根據細胞種類把細胞傳到幾個培養皿中。一般,癌細胞分5個,正常細胞傳3個。繼續培養。
3、凍存,把細胞消化下來並離心(同上)。用配好的凍存液把細胞懸浮起來,分裝到滅菌的凍存管中,靜止幾分鐘,寫明細胞種類,凍存日期。4℃ 30min,-20℃ 30min,-80℃過夜,然後放到液氮灌中儲存。凍存液的配製:70%的完全培養基 20??%DMSO. DMSO要慢慢滴加,邊滴邊搖。
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癡迷是什麼意思
1、癡迷,是一種漢語詞彙,它是指極度迷戀某人或某種事物而不能自拔,嚴重者將脫離現實,活在自己的世界中。2、沉迷不悟。元馬致遠《青衫淚》第二折:“這其間枉了我再三相勸,怎當他癡迷漢苦死歪纏。”《紅樓夢》第五回:“看破的遁入空門,癡迷的枉送了性命。”...
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母親的恩情課文
1、唐朝有個詩人,名叫孟郊。有一次,他要出遠門了,母親忙着給他縫補衣裳。夜深了,母親還在油燈下一針針一線線地縫着。她想,孩兒這次外出,還不知道什麼時候才能回來……2、第二天清早,母親把孟郊送到村外。她望着兒子說:“郊兒,你可要早點兒回來呀!”孟郊聽了不住地點頭。...
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處置的意思
1、處置是一個漢語詞語,拼音是chǔzhì,意思是分別事理,使各得其所;處罰。2、近義詞:處理、措置、辦理、管理、解決。3、出自《漢書·薛宣傳》:“宣知惠不能,留彭城數日,案行舍中,處置什器,觀視園菜,終不問惠以吏事。”4、造句:等到塵埃落定後,再來處置他也不遲。...
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酒池肉林的意思,酒池肉林的解釋
1、酒池肉林(拼音:jiǔchíròulín)是一則來源於歷史故事的成語,成語有關典故最早出自於西漢·司馬遷《史記·殷本紀》。2、“酒池肉林”的原義是殷紂以酒爲池,以肉爲林,爲長夜之飲;原指荒淫腐化、極端奢侈的生活,後也形容酒肉極多;在句子中可充當賓語、定語。...