動物細胞培養的步驟簡介
1、復甦,把凍存管從液氮中取出來,立即投入37℃水浴鍋中,輕微搖動。液體都融化後(大概1-1.5分鐘),拿出來噴點酒精放到超淨工作台裏。把上述細胞懸液吸到裝10ml培養基的15ml的離心管中(用培養基把凍存管洗一遍,把粘在壁上的細胞都洗下來),1000轉離心5分鐘。把上清液倒掉,加1ml培養基把細胞懸浮起來。吸到裝有10ml培養基的10cm培養皿中前後左右輕輕搖動,使培養皿中的細胞均勻分佈。標好細胞種類和日期、培養人名字等,放到CO2培養箱中培養,細胞貼壁後換培養基。3天換一次培養基。
2、傳代,培養皿中的細胞覆蓋率達到80%-90%時要傳代。把原有培養基吸掉。加適當的胰蛋白酶(能覆蓋細胞就行),消化1-2分鐘。細胞都變圓後加如入等體積的含血清的培養基終止消化。用移液槍吹打細胞,把細胞都懸浮起來。把細胞吸到15ml的離心管中,1000轉離心5分鐘。倒掉上清液,加1-2ml培養基,把細胞都吹起來。根據細胞種類把細胞傳到幾個培養皿中。一般,癌細胞分5個,正常細胞傳3個。繼續培養。
3、凍存,把細胞消化下來並離心(同上)。用配好的凍存液把細胞懸浮起來,分裝到滅菌的凍存管中,靜止幾分鐘,寫明細胞種類,凍存日期。4℃ 30min,-20℃ 30min,-80℃過夜,然後放到液氮灌中保存。凍存液的配製:70%的完全培養基 20??%DMSO. DMSO要慢慢滴加,邊滴邊搖。
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日薄西山的薄什麼意思,日薄西山的薄的意思解釋
1、“薄”在此處的意思是:迫近,靠近。2、“日薄西山”的意思是:指太陽快要落山。比喻人到老年或腐朽的事物衰敗接近滅亡。3、出處:晉·李密《陳情表》:“但以劉日薄西山,氣息奄奄,人命危淺,朝不慮夕。”4、白話釋義:只是因為祖母劉氏壽命即將終了,氣息微弱,生命垂危,早上不...
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心樂之原文及翻譯
1、心樂之的樂意思:以……為樂,對……感到快樂。2、原文:《小石潭記》【作者】柳宗元【朝代】唐從小丘西行百二十步,隔篁竹,聞水聲,如鳴珮環,心樂之。伐竹取道,下見小潭,水尤清冽。全石以為底,近岸,卷石底以出,為坻,為嶼,為嵁,為巖。青樹翠蔓,蒙絡搖綴,參差披拂。潭中魚可百許頭...
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名人勵志小故事
1、越王勾踐被吳國軍隊打敗,忍受奇恥大辱,給吳王夫差當奴僕.三年後,他被釋放回國,立志洗雪國恥.他卧薪嚐膽,發憤圖強,終於打敗了吳國。2、包拯包青天,聰穎,勤學好問,尤喜推理斷案,其家父與知縣交往密切,包拯從小耳濡目染,學會了不少的斷案知識,尤其在焚廟殺僧一案中,包拯根據...
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用怨言造句子
造句指懂得並使用字詞,按照一定的句法規則造出字詞通順、意思完整、符合邏輯的句子。依據現代語文學科特徵,可延伸為寫段、作文的基礎,是學生寫好作文的基本功。造句來源清俞樾《春在堂隨筆》卷八:“其用意,其造句,均以纖巧勝。”夏丏尊葉聖陶《文心雕龍》四:“造句也...