动物细胞培养的步骤简介
1、复苏,把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动。液体都融化后(大概1-1.5分钟),拿出来喷点酒精放到超净工作台里。把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存管洗一遍,把粘在壁上的细胞都洗下来),1000转离心5分钟。把上清液倒掉,加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动,使培养皿中的细胞均匀分布。标好细胞种类和日期、培养人名字等,放到CO2培养箱中培养,细胞贴壁后换培养基。3天换一次培养基。
2、传代,培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。把原有培养基吸掉。加适当的胰蛋白酶(能覆盖细胞就行),消化1-2分钟。细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。用移液枪吹打细胞,把细胞都悬浮起来。把细胞吸到15ml的离心管中,1000转离心5分钟。倒掉上清液,加1-2ml培养基,把细胞都吹起来。根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般,癌细胞分5个,正常细胞传3个。继续培养。
3、冻存,把细胞消化下来并离心(同上)。用配好的冻存液把细胞悬浮起来,分装到灭菌的冻存管中,静止几分钟,写明细胞种类,冻存日期。4℃ 30min,-20℃ 30min,-80℃过夜,然后放到液氮灌中保存。冻存液的配制:70%的完全培养基 20??%DMSO. DMSO要慢慢滴加,边滴边摇。
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痴迷是什么意思
1、痴迷,是一种汉语词汇,它是指极度迷恋某人或某种事物而不能自拔,严重者将脱离现实,活在自己的世界中。2、沉迷不悟。元马致远《青衫泪》第二折:“这其间枉了我再三相劝,怎当他痴迷汉苦死歪缠。”《红楼梦》第五回:“看破的遁入空门,痴迷的枉送了性命。”...
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母亲的恩情课文
1、唐朝有个诗人,名叫孟郊。有一次,他要出远门了,母亲忙着给他缝补衣裳。夜深了,母亲还在油灯下一针针一线线地缝着。她想,孩儿这次外出,还不知道什么时候才能回来……2、第二天清早,母亲把孟郊送到村外。她望着儿子说:“郊儿,你可要早点儿回来呀!”孟郊听了不住地点头。...
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处置的意思
1、处置是一个汉语词语,拼音是chǔzhì,意思是分别事理,使各得其所;处罚。2、近义词:处理、措置、办理、管理、解决。3、出自《汉书·薛宣传》:“宣知惠不能,留彭城数日,案行舍中,处置什器,观视园菜,终不问惠以吏事。”4、造句:等到尘埃落定后,再来处置他也不迟。...
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酒池肉林的意思,酒池肉林的解释
1、酒池肉林(拼音:jiǔchíròulín)是一则来源于历史故事的成语,成语有关典故最早出自于西汉·司马迁《史记·殷本纪》。2、“酒池肉林”的原义是殷纣以酒为池,以肉为林,为长夜之饮;原指荒淫腐化、极端奢侈的生活,后也形容酒肉极多;在句子中可充当宾语、定语。...